液相色譜儀的正確操作

液相色譜儀的系統由儲液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。與經(jīng)典的液相色譜相比，具有液相所用的固定相粒度?。ǎ担酰?１０ｕｍ）、傳質(zhì)快、柱效高的優(yōu)勢。近年來(lái)，在保健食品功效成分、營(yíng)養強化劑、維生素類(lèi)、蛋白質(zhì)的分離測定等應用廣泛。世界上約有８０％的有機化合物可以用ＨＰＬＣ來(lái)分析測定。

液相色譜的分離過(guò)程 ＨＰＬＣ，借溶質(zhì)在兩相間分配系數、親和力、吸附力或分子大小不同而引起的排阻作用的差別使不同溶質(zhì)得以分離。

液相色譜儀操作步驟：

1)過(guò)濾流動(dòng)相，根據需要選擇不同的濾膜。
2)對抽濾后的流動(dòng)相進(jìn)行超聲脫氣10-20分鐘。
3)打開(kāi)HPLC工作站(包括計算機軟件和色譜儀)，連接好流動(dòng)相管道，連接檢測系統。
4)進(jìn)入HPLC控制界面主菜單，manual，進(jìn)入手動(dòng)菜單。
5)一段時(shí)間沒(méi)用，或者換了新的流動(dòng)相，需要先沖洗泵和進(jìn)樣閥。沖洗泵，直接在泵的出水口，用針頭抽取。沖洗進(jìn)樣閥，需要在manual菜單下，先purge，再start，沖洗時(shí)速度不要超過(guò)10ml/min。
6)調節流量，初次使用新的流動(dòng)相，可以先試一下壓力，流速越大，壓力越大，一般不要超過(guò)2000。injure，選用合適的流速，on，走基線(xiàn)，觀(guān)察基線(xiàn)的情況。
7)設計走樣方法。file，選取selectusersandmethods，可以選取現有的各種走樣方法。若需建立一個(gè)新的方法，newmethod。選取需要的配件，包括進(jìn)樣閥，泵，檢測器等，根據需要而不同。選完后，protocol。一個(gè)完整的走樣方法需要包括：a.進(jìn)樣前的穩流，一般2-5分鐘；b.基線(xiàn)歸零；c.進(jìn)樣閥的loading-inject轉換；d.走樣時(shí)間，隨不同的樣品而不同。
8)進(jìn)樣和進(jìn)樣后操作。選定走樣方法，start。進(jìn)樣，所有的樣品均需過(guò)濾。方法走完后，postrun，可記錄數據和做標記等。全部樣品走完后，再用上面的方法走一段基線(xiàn)，洗掉剩余物。
9)關(guān)機時(shí)，先關(guān)計算機，再關(guān)液相色譜。