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飼料檢測液相色譜儀的“堵”,怎么解決?

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  飼料檢測液相色譜儀是屬于易學(xué)難用的儀器,特別講究“正確使用”和經(jīng)驗。液相工作者接觸多的是流動(dòng)相,也就是流動(dòng)相,是造成液相色譜各種問(wèn)題的主要源頭。
  飼料檢測液相色譜儀常見(jiàn)的故障一是堵,二是漏。今天就先來(lái)說(shuō)說(shuō)“堵”(注:流動(dòng)相以甲醇為例,色譜柱以C18為例)
  “堵”的表現現象就是柱壓異常升高,直接原因就是流路不暢。堵塞的主要位置就是在色譜柱的前端,主要原因就是流動(dòng)相里有雜質(zhì),雜質(zhì)的主要來(lái)源就是細菌。
  一、配制流動(dòng)相時(shí)細菌污染
  首先我們要認識到,一般的國產(chǎn)甲醇其實(shí)不需要額外過(guò)濾處理,直接使用沒(méi)有問(wèn)題。即使是有些固態(tài)微粒雜質(zhì),也能在液相流路系統前端的過(guò)濾頭上排除,容易引起問(wèn)題的,是水中的細菌。
  新制備的純水在室內放置幾天就會(huì )長(cháng)菌,而這些細菌雖然肉眼不可見(jiàn),卻足以堵塞柱填料顆粒的空隙,造成柱子很快報廢。這就是在配制流動(dòng)相時(shí)造成的細菌污染的原因,解決它的方法很簡(jiǎn)單,就是確保水的可靠性。這里有兩種方式推薦:
 ?。?)理想的方式當然是購買(mǎi)實(shí)驗室專(zhuān)用純水機,既方便又可靠,質(zhì)量也放心。缺點(diǎn)就是價(jià)格不菲。
 ?。?)成箱購買(mǎi)市售品牌純凈水,如500ml一支的怡寶或娃哈哈,這些水的質(zhì)量足以應付液相色譜的要求。先隨機抽取一支做一下細菌平板實(shí)驗,待菌落數合格方可使用。這樣每次只要單獨開(kāi)一支即可,也很方便。每次成本2元左右。
  這里特別指出一個(gè)細節:在絕大多數書(shū)本上,凡談到配制流動(dòng)相都會(huì )談到有一個(gè)過(guò)濾的步驟。但是從我們長(cháng)期使用的實(shí)際效果來(lái)說(shuō),只要能保證水的質(zhì)量,這一步可以也應當去除。原因有以下幾點(diǎn):
 ?。?)流動(dòng)相過(guò)濾在理論上有好處,但是實(shí)際操作時(shí)由于不可能做到專(zhuān)瓶專(zhuān)用,反而容易造成的交叉污染,對于配比復雜的流動(dòng)相影響更大。
 ?。?)流動(dòng)相過(guò)濾在經(jīng)濟成本上不劃算。買(mǎi)一套過(guò)濾裝置要6000多元,且過(guò)濾器是比較容易損壞的設備。主要是過(guò)濾片的成本太高,一片就要幾十元。按一般液相柱的正常使用壽命計算,過(guò)濾片的成本會(huì )遠遠高于色譜柱的成本。
 ?。?)流動(dòng)相過(guò)濾對于工作效率成本不劃算。使用溶劑過(guò)濾器有一個(gè)預清洗、裝備、使用、用后清洗,晾干的過(guò)程,至少也有一個(gè)小時(shí)的時(shí)間。這個(gè)成本也不能忽視。
 ?。?)在實(shí)際工作未發(fā)現流動(dòng)相不過(guò)濾會(huì )對柱壽命有任何影響。我們起碼有6年時(shí)間沒(méi)有做過(guò)流動(dòng)相過(guò)濾的工作,但是和國內同行相比較,在同等使用強度下我們的柱壽命是比較長(cháng)的。

 

  二、使用流動(dòng)相時(shí)的細菌污染
  指的是:流動(dòng)相剛開(kāi)始沒(méi)有長(cháng)菌,在使用時(shí)卻產(chǎn)生了細菌污染。這主要是在使用多元液相色譜儀時(shí)的一種不良使用習慣造成的。
  舉簡(jiǎn)單的例子:50%的甲醇水流動(dòng)相,有兩種使用方式。一種方式是在上機前就配好混合在一起,另一種方式是在流路A放純甲醇,流路B放純水。從單純實(shí)驗效果來(lái)說(shuō),后一種有明顯的優(yōu)點(diǎn):首先是簡(jiǎn)單,不需要實(shí)驗者另個(gè)計算配比混合,其次就是比例準確,能保留時(shí)間重復性較好的實(shí)驗效果。
  但是,它有一個(gè)致命的缺陷,就是純水在流動(dòng)相瓶中幾天時(shí)間就會(huì )長(cháng)細菌(很多情況下不僅僅用純水作流動(dòng)相,而是用緩沖鹽溶液,本身就是肥料,細菌長(cháng)得更迅速),一旦有細菌柱子就壞得很快。所以這種方式要求操作人員每次實(shí)驗都要用新制備的純水,更要求在每次實(shí)驗后把水相換掉,換成甲醇沖洗干凈,這一點(diǎn)在實(shí)際工作中很多人意識不強,就是意識到了但多次使用中總有一兩次會(huì )遺漏,但是往往這一兩次就足以產(chǎn)生致命的影響。因為液相色譜柱的堵塞是不可逆的。
  所以,寧可犧牲小小的保留時(shí)間的重復性,也不要用純水溶液作為流動(dòng)相的一組。從實(shí)際實(shí)驗效果來(lái)說(shuō),我建議用10%的甲醇水代替純水溶液(以前我做過(guò)不同比例甲醇水的細菌總數實(shí)驗,在5%就基本可以抑菌,在10%及以上就可以殺菌了),這樣可以有效排除長(cháng)細菌的隱患,既可作流動(dòng)相,也可沖柱。就算是在配制流動(dòng)相時(shí)會(huì )計算得麻煩一些,但是一次麻煩,終身受益。

 

  三、不適當操作
  常見(jiàn)問(wèn)題的有以下幾種:
 ?。?)在更換零件時(shí)選擇的型號有誤,接口不是很匹配,在擰緊的時(shí)候產(chǎn)生變形而使得管路堵塞。
 ?。?)樣品處理液凈化得不干凈,長(cháng)期會(huì )在六通閥和柱之間形成阻塞不暢。
 ?。?)在使用手動(dòng)六通閥時(shí),有些人可能由于手勁小的原因,轉動(dòng)的不到位,于是造成流路形成了死堵,壓力快速升高超過(guò)警戒值。
 ?。?)在使用金屬管路作出廢液管時(shí),應當注意廢液瓶中先放一些水,并把廢液管的出口端放在液面下。如果位于在液相上且實(shí)驗使用較高濃度的緩沖鹽溶液,在停機時(shí)可能在出口端結晶成塊并造成堵塞。這種情況不常見(jiàn),但卻的確發(fā)生過(guò)。
  “堵”的原因講了不少,現介紹查堵的方法。
  在發(fā)生“堵”的現象后,就需要找出原因,主要是什么位置發(fā)生了“堵”。注意,絕大多數情況下,整個(gè)系統只會(huì )有一個(gè)地方發(fā)生堵塞。
  查堵的方法是從尾向前逆向分段拆開(kāi),仔細觀(guān)察壓力數值,如果某一個(gè)部件(柱子除外)裝上和拆下時(shí)的壓力差別很大,可發(fā)展變化判斷。至于柱的堵塞,可以通過(guò)換同樣規格的柱的壓力是否一致來(lái)判斷。

 

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